SETERILISASI MERUPAKAN TAHAPAN YANG PALING PENTING DALAM KULTUR JARINGAN

Oleh IRANI MAYAHESTI, SP.

(GURU SMK NEGERI 1 SUSUKAN)

Salah satu tahapan dalam kultur jaringan adalah sterilisasi. Seterilisasi merupakan langkah awal dalam kultur jaringan dan sebagai factor yang mempengaruhi dalam menentukan keberhasilan teknik kultur jaringan. sterilisasi mempunyai peranan penting dalam keberhasilan teknik kultur jaringan. Dalam kultur jaringan erat kaitannya dengan kontaminasi. Apabila terjadi kontaminasi maka akan menyebabkan tanaman yang kita tumbuhkan di dalam media tidak dapat berkembang. Untuk menghidari terjadinya kontaminasi ini perlu dilakukannya sterilisasi. Sterilisasi adalah suatu proses untuk membunuh semua jasad renik yang ada, jika ditumbuhkan di dalam suatu medium tidak ada jasad renik yang dapat berkembang baik. Sterilisasi harus dapat membunuh renik yang paling tahan panas yaitu spora bakteri.

Pada prinsipnya sterilisasi dapat dilakukan dengan 3 cara yaitu secara fisik, kimiawi dan mekanik.

1.         Sterilisasi secara fisik (pemanasan, penggunaan sinar gelombang pendek yang dapat dilakukan selama senyawa kimia yang akan disterilkan tidak akan berubah atau terurai akibat temperatur atau tekanan tinggi). Dengan udara panas, dipergunakan alat “bejana/ ruang panas” (oven dengan temperatur 170o–180oC dan waktu yang digunakan adalah 2 jam yang umumnya untuk peralatan gelas).Pemanasan terdiri dari:

a.         Pemijaran (dengan api langsung) yaitu membakar alat pada api secara langsung, contoh alat: jarum inokulum, pinset, batang L dan lain-lain;

b.         Panas kering, yaitu sterilisasi dengan oven kira-kira 60-1800C. Sterilisasi panas kering cocok untuk alat yang terbuat dari kaca misalnya erlenmeyer,tabung reaksi dan lain lain;

c.         Uap air panas, konsep ini mirip dengan mengukus. Bahan yang mengandung air lebih tepat menggungakan metode ini supaya tidak terjadi dehidrasi; dan

d.         Uap air panas bertekanan: menggunalkan autoclave.

2.         Sterilisasi secara kimia (misalnya dengan penggunaan disinfektan, larutan alkohol, larutan formalin).

3.         Sterilisasi secara mekanik, digunakan untuk beberapa bahan yang akibat pemanasan tinggi atau tekanan tinggi akan mengalami perubahan, misalnya adalah dengan saringan/ filter. Sistem kerja filter, seperti pada saringan lain adalah melakukan seleksi terhadap partikel-partikel yang lewat (dalam hal ini adalah mikroba) (Suriawiria, 2005).

Berikut ini beberapa istilah yang penting diketahui dalam kaitannya dengan sterilisasi.

Desinfeksi

Cara mematikan organisme yang dapat menyebabkan infeksi untuk bisa mencapai keadaan steril. Desifeksi bisa dilakukan dengan menggunakan bahan kimia fenol, formaldehid, klor, yodium, atau sublimat. Umumnya desifeksi dimaksudkan untuk mematikan sel-sel vegetatif yang lebih sensitive, tetapi bukan untuk spora-spora tahan panas. Istilah desinfeksi biasaya ditujukan untuk benda-benda mati seperti lantai, piring, dan pakaian.

Antiseptik

Umumnya dimaksudkan untuk bahan-bahan yang dapat menghambat atau mematikan mikroorganisme, khususnya yang kontak dengan tubuh tanpa mengakibatkan kerusakan pada jaringan.

Bakteriostatik

Substansi yang bersifat menghambat multiplikasi atau pertumbuhan, tetapi jika zat penghambat dihilangkan, maka multiplikasi dapat dilanjutkan kembali

Bakterisida

Setiap zat atau agen yang dapat membunuh/memusnahkan bakteri, contoh beberapa antibiotika, antiseptika, dan disinfektan.

Daftar Pustaka

-           Agribisnis Prembibitan dan Kultur Jaringan Tanaman SMK/MAK Kelas XI Semester 3. 2014. Kementrian Pendidikan dan Kebudayaan Republik Indonesia (263 halaman)

-           Sandra, Edhi. 2013.Cara Mudah Memahami dan Menguasai Kultur Jaringan. Bogor. IPB Press.

-           Wahyuni, Isna.2019. Agribisnis Pembibitan Dan Kultur Jaringan Tanaman Jilid 2. Kompetensi Keahlian Pemulaan dan Pembenihan Tanaman. Direktorat Pembina SMK Kementrian Pendidikan dan Kebudayaan Republik Indonesia (168 halaman)